麥氏比濁管是McFarland發(fa)明(ming)的(de)一(yi)種(zhong)用(yong)於(yu)微(wei)生(sheng)物(wu)比(bi)濁(zhuo)的(de)不(bu)同(tong)濁(zhuo)度(du)的(de)標(biao)準(zhun)濁(zhuo)度(du)管(guan)。具(ju)體(ti)的(de)配(pei)製(zhi)方(fang)法(fa)是(shi)根(gen)據(ju)硫(liu)酸(suan)和(he)氯(lv)化(hua)鋇(bei)的(de)比(bi)例(li)來(lai)定(ding)的(de),有(you)表(biao)可(ke)查(zha),這(zhe)樣(yang)不(bu)同(tong)比(bi)例(li)生(sheng)成(cheng)的(de)硫(liu)酸(suan)鋇(bei)沉(chen)澱(dian)的(de)濃(nong)度(du)不(bu)同(tong),且(qie)都(dou)有(you)定(ding)值(zhi)。麥(mai)氏(shi)比(bi)濁(zhuo)管(guan)的(de)配(pei)比(bi)如(ru)下(xia):

zheshichuantongdemaishibizhuoguandepeizhifangfa,muqianyeyoushishoudeshangpinhuachanpin,buxuyaozijipeizhi,bingqiehaiyouyourujiaolizixuanfuyezhichengdemaishibizhuoguan,yuchuantongdemaishibizhuoguanxiangbi,baocunshijiangengchangyegengwending。danmaishibizhuoguanjutiyinggaizenô使用呢?
操作方法:
1、輕搖標準試管。
2、無菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標準管相同直徑(大小)的無菌試管中。
3、以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。
4、直接用眼睛看(需要經驗,誤差較大)。
5、找張白紙,打上平行直線,然後觀察讀數(如圖示,利用光在不同濃度液體折射不同)。

注意事項:
1、如果測定的肉湯培養物不澄清,由培養物的值減去δ接種培養基的值來校正細菌濃度。4號管(肉湯培養物)-1號管(孵育過的δ接種的肉湯管)=3號管(校正讀數)。
2、如果肉湯顏色很深,把δ接種試管放在標準管的後麵讀數即可。
3、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋塗布計數。
4、此濃度是對應的大腸杆菌的濃度,如果是其他細菌,會有一定的差別,但通常差別都在一個數量級之內,適合於普通實驗。
5、此種方法測定的準確性不是很高,如果是對細菌數量要求較精確的,請用紫外分光光度計。
6、麥氏比濁液應放室溫暗處保存,用前混勻,有效期為6個月。應用時為了準確也可以使用比濁儀但一定要防止麥氏濁度標準管δ搖勻或已過期失效。
在微生物學檢驗中,麥氏比濁法常作為細菌鑒定、實驗配製菌液時大致判斷菌液濃度的一種方法,通常認為,如將配菌液濃度配成0.5麥氏比濁管時,相當於1.0×108細菌數/mL,由於方法本身就是一種估計的方法,所以盡管不同細菌大小差異很大,但除了真菌孢子,細菌的差別不大,結果不會有影響。
另附孢子菌懸液製作方法:
菌種活化
將保藏菌接種在PDA斜麵培養基試管中,培養7d~14d,使生成大量孢子。δ製備孢子懸液時,不得拔去棉塞。ÿ打開1支隻供製備1次懸液,ÿ次製備孢子懸液必須使用新培養的ù菌孢子。
孢子懸液製備
在上述PDA斜麵培養基中加入少量無菌蒸餾水,用無菌接種環輕輕刮取表麵的新鮮ù菌孢子,將孢子懸液置於250mL錐形瓶內,然後注入40mL洗脫液。
錐形瓶中加入直徑5mm的玻璃珠10粒~15liyubaozihunhe,jusaihouzhishuiyuzhendangqizhongbuduanzhendangshichengtuandebaozisankai,ranhouyongdancengmianshabuguolvyichuqujunsi。jiangqizhuangrumiejunlixinguanzhong,yonglixinjifenlichendianbaozi,qushangqingye。zaijiaru40mL洗脫液,重複離心操作3次。製成濃度為(0.8~1.2)×106spores/mL的ù菌jun孢bao子zi懸xuan液ye。若ruo需xu要yao精jing確que計ji數shu,則ze可ke以yi用yong改gai良liang察cha氏shi液ye體ti培pei養yang基ji稀xi釋shi孢bao子zi懸xuan液ye,用yong血xue球qiu計ji數shu板ban計ji數shu。孢bao子zi懸xuan液ye應ying在zai當dang天tian使shi用yong,若ruo不bu在zai當dang天tian使shi用yong應ying在zai 3℃~7℃保存,並盡量在4d內使用。
手機版








