本文將從PCR實驗室布局

、工作區域的主要功能和設備配置、實驗室的通風係統及壓力控製、裝飾裝修材料要求及其他注意事項來解說。

原則上分為四個區域：試劑準備區、樣品製備區、擴增區和擴增產物分析區。

PCR實驗室原則上為試劑準備區、樣品製備區、擴(kuo)增(zeng)區(qu)和(he)擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)分(fen)析(xi)區(qu)四(si)個(ge)單(dan)獨(du)的(de)工(gong)作(zuo)區(qu)域(yu)並(bing)設(she)有(you)專(zhuan)用(yong)走(zou)廊(lang)，各(ge)工(gong)作(zuo)區(qu)域(yu)應(ying)設(she)緩(huan)衝(chong)間(jian)，工(gong)作(zuo)區(qu)與(yu)緩(huan)衝(chong)間(jian)宜(yi)安(an)裝(zhuang)連(lian)鎖(suo)裝(zhuang)置(zhi)。不(bu)同(tong)功(gong)能(neng)的(de)工(gong)作(zuo)區(qu)應(ying)是(shi)分(fen)隔(ge)獨(du)立(li)的(de)，各(ge)工(gong)作(zuo)區(qu)有(you)明(ming)顯(xian)的(de)標(biao)誌(zhi)，不(bu)能(neng)直(zhi)通(tong)，如(ru)果(guo)緊(jin)密(mi)相(xiang)連(lian)，需(xu)安(an)裝(zhuang)物(wu)品(pin)傳(chuan)遞(di)窗(chuang)。

PCR實驗室區域的設置並不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：

1.如果樣本在擴增之前需要粉碎處理，則需要增加一個區域用於樣品的粉碎。

2.如果采用實時熒光PCR法
，則擴增區和分析區可以合並為一個區。

3.如果采用全自動化PCR分析儀，則標本製備區、擴增區和分析區可以合並為一個區。

前兩區為擴增前區

，後兩區為擴增後區
，擴增前區與擴增後區應嚴格分開。實驗材料

、試劑、記錄紙
、筆、清潔材料等，隻能從擴增前區流向擴增後區
，即從試劑準備區、樣yang品pin製zhi備bei區qu到dao擴kuo增zeng區qu和he擴kuo增zeng產chan物wu分fen析xi區qu，不bu得de逆ni向xiang流liu動dong。實shi驗yan室shi的de氣qi流liu也ye應ying從cong擴kuo增zeng前qian區qu流liu向xiang擴kuo增zeng後hou區qu，不bu得de逆ni向xiang流liu動dong。各ge工gong作zuo區qu頂ding部bu應ying安an裝zhuang紫zi外wai燈deng，紫zi外wai燈deng的de波bo長chang為wei254nm，每20㎡一支40W的紫外燈。

原則上的四大區域注意正壓負壓的控製。

1.試劑準備區：

主要進行試劑的製備
、fenzhuanghezhufanyinghunheyedezhibei。shijiheyongyuyangpinzhizuodecailiaoyingzhijieyunsongzhigaiqu，budejingguoqitaquyu。shijiyuancailiaobixuzhucunzaibenqunei，bingzaibenquneizhibeichengsuoxudeshiji。benquzhuyaoshebeiyoutianping、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。

對於氣流壓力的控製，本區並沒有嚴格的要求。

2.樣品製備區：

主要進行樣品的保存、核酸(RNA

、DNA)提取
、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全櫃、離心機
、加樣器
、振蕩器

、恒溫水浴等。

本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠汙染。

3.擴增區：

該區域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外

，反應混合液(來自試劑貯存和製備區)製備成反應混合液和已製備的DNA模板(來自標本製備區)的(de)加(jia)入(ru)等(deng)也(ye)可(ke)在(zai)本(ben)區(qu)內(nei)進(jin)行(xing)。對(dui)於(yu)氣(qi)流(liu)壓(ya)力(li)的(de)控(kong)製(zhi)
，相(xiang)對(dui)於(yu)鄰(lin)近(jin)區(qu)域(yu)為(wei)負(fu)壓(ya)，以(yi)避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)從(cong)本(ben)區(qu)漏(lou)出(chu)。為(wei)避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)所(suo)致(zhi)的(de)汙(wu)染(ran)，應(ying)盡(jin)量(liang)減(jian)少(shao)在(zai)本(ben)區(qu)內(nei)不(bu)必(bi)要(yao)的(de)走(zou)動(dong)。個(ge)別(bie)操(cao)作(zuo)如(ru)加(jia)樣(yang)等(deng)應(ying)在(zai)超(chao)淨(jing)台(tai)內(nei)進(jin)行(xing)。

該區域的設備主要是核酸擴增熱循環儀、加樣器
、超淨台等。其中熱循環儀的電源應專用，並配備一個穩壓電源或UPS，以防止由於電壓的波動對擴增測定的影響主要進行DNA擴增。

本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。

4.擴增產物分析區：

擴增產物的測定。本區主要設備有酶標儀、洗板機

、加樣器和水浴箱等。

本區的壓力梯度的要求為：相對於鄰近區域為負壓

，以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。

四大區域應形成單向流線、宜采用全送全排。

各區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流
、人流與氣流
，形成單向流程的保護屏障
，避免實驗之間的相互幹擾


，防止氣溶膠擴散對實驗過程造成汙染。

PCR實驗室並沒有嚴格的淨化要求
，但是為避免各個實驗區域交叉汙染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式
，嚴格控製送
、排風的比例以保證各實驗區壓力要求。

另外
，PCR實驗室內通常有生物安全櫃
、tongfengguidengshengchanshebei，zheleishebeipaifengliangdaqieshiyongshijianyoujiangexing，bingbuyukongtiaoxitongyunxingshijianyizhi，zhejiudaozhiyouzhexieshebeidefangjianzaishebeiqitingdeshihouhenrongyishiya，yuanbenzhengchangdeyalitidushunjianjiupohuaile。zhezhengshiPCR實驗室空調係統設計的難點所在。

材料要求：

實驗室圍護結構應牢固、氣密性好。所有陰陽角宜采用圓弧過渡
，牆體內壁光潔
、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒。地麵使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪，材料應滿足無縫隙、無滲漏
、光潔、耐腐蝕的要求。

樣品製備區空間要大些。

1.幾個區域的大小設置情況，試劑準備區、擴增區、擴增產物分析區，空間可以相對小一些，樣品製備區要放置生物安全櫃和低溫冰箱，空間應大一些。

2.試劑準備區、樣品製備區設緊急洗眼器
，以保證操作人員的安全。

3.PCR實驗室沒有嚴格的淨化要求
，可以根據使用情況和資金的投入選擇。