1.細菌保存於穿刺培養物中:一般細菌保存於穿刺培養物可以維持兩年。具體方法如下:用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落,針緩慢穿過瓊脂到達瓶底,連續幾次,蓋上瓶蓋擰緊,做好標記。室溫下存放於暗處。(最好一點可以將瓶蓋放鬆,在適當溫度下培養過夜,再擰緊瓶蓋並加封Parafilm膜,室溫或最好在4度避光保存)。
2.細菌保存於含有甘油的培養物中:
(1)在液體培養基中生長的細菌培養物:取0.85ml細菌培養物,加入0.15ml高壓滅菌甘油,振蕩培養物使甘油分布均勻,然後轉移到標記好的保存管內,密封,在乙醇-幹冰或液氮中凍結後再轉至-70度長期保存。在複蘇時,用滅菌接種針刮取凍結的培養物表麵,然後立即把黏附於接種針上的細菌劃於含適當抗生素(antibiotic)的LB瓊脂平板表麵,於37度過夜。
(2)在瓊脂平板上生長的細菌培養物:從瓊脂平板表麵刮下細菌放入裝有2mlLB的無菌試管內,再加入等量的含有30%滅菌甘油的LB培pei養yang基ji,振zhen蕩dang使shi甘gan油you完wan全quan分fen布bu均jun勻yun後hou,分fen裝zhuang於yu無wu菌jun保bao存cun管guan內nei,密mi封feng,再zai按an前qian述shu方fang法fa冰bing凍dong保bao存cun。這zhe一yi方fang法fa的de優you點dian在zai於yu可ke用yong於yu保bao存cun在zai質zhi粒li載zai體ti上shang建jian立li的decDNA文庫。
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