原因一:過早打開滅菌鍋
當滅菌鍋壓力表示數為0而(er)溫(wen)度(du)表(biao)示(shi)數(shu)還(hai)高(gao)於(yu)室(shi)溫(wen)時(shi),不(bu)要(yao)打(da)開(kai)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)。因(yin)為(wei)打(da)開(kai)鍋(guo)蓋(gai)瞬(shun)間(jian),鍋(guo)內(nei)大(da)量(liang)熱(re)量(liang)散(san)出(chu),溫(wen)度(du)突(tu)然(ran)降(jiang)低(di),試(shi)管(guan)內(nei)溫(wen)度(du)也(ye)隨(sui)著(zhe)降(jiang)低(di),導(dao)致(zhi)管(guan)內(nei)氣(qi)壓(ya)減(jian)小(xiao),沸(fei)點(dian)降(jiang)低(di),部(bu)分(fen)水(shui)會(hui)汽(qi)化(hua)留(liu)在(zai)小(xiao)導(dao)管(guan)內(nei)。
解決辦法:等滅菌鍋內氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。
原因二:試管塞塞得太緊
試管塞塞得太緊在滅菌時會導致試管內與滅菌鍋內壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內壓力會大於管內壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內壓力小於管內壓力。鍋內壓力大於管內壓力時,試管內壓力不夠,不能將小導管內氣體排盡,就留有氣泡;鍋內壓力小於管內壓力時,可能會使試管塞和培養基崩出,培養基報廢。
解決辦法:改用透氣性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。
原因三:小導管口太小
womenkeyibayigenmaoxiguanyiduanfengkou,lingyiduanchajinshuili,maoxiguanlizenmedoubuhuijinshui。tongyangbayigeshaobeidaokoujinshuilijiuhenrongyijinshuile。xiaodaoguanzaijiayahouyifangmianshuiyaojinqu,lingwailimiandekongqiyaochulai,ruguokoutaixiaodehua,kongqiburongyichuqu,shuiyeburongyijinlai,jiuhuidaozhiqipaoliuzailimianle。
解決辦法:改用內空較大的導管,盡量使用V型管,不要使用錐型管。
原因四:培養基質量引起
youpeiyangjizhiliangyinqiqitibunengpaijinhuopeiyangjihanyougaowengaoyafenjiechanqidechengfen。miejunshiyongshuizuopeiyangjizudeduizhaoshiyan,ruopeiyangjizuyouqipao,erduizhaozumeiyouqipao,kequedingshiyouciyuanyinyinqi。
解決辦法:改用其它培養基。
原因五:滅菌鍋壓力不夠氣體不能排盡
滅mie菌jun鍋guo最zui大da壓ya力li不bu夠gou不bu能neng使shi管guan內nei液ye體ti強qiang行xing把ba氣qi體ti擠ji出chu,最zui後hou還hai留liu有you小xiao氣qi泡pao,還hai會hui使shi溫wen度du上shang升sheng緩huan慢man,或huo達da不bu到dao滅mie菌jun溫wen度du。此ci原yuan因yin的de可ke能neng性xing較jiao小xiao,我wo們men可ke以yi在zai排pai除chu原yuan因yin一yi、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導管做試驗,若還仍不能達到效果,就要檢查滅菌鍋了。
解決辦法:修理滅菌鍋。
注意事項:1.小導管內出現氣泡通常是由前3種原因引起的,實際操作中可以按以上順序進行排查。2.千萬不要將試管倒置,以免試管口和試管塞受培養基汙染。
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