1.蛋白酶K:
能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白。再尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩衝液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2.SDS:
十二烷基硫酸鈉. 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,並解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉澱
3.IPTG
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用於藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等. IPTG和(he)乳(ru)糖(tang)的(de)結(jie)構(gou)相(xiang)似(si),所(suo)以(yi)它(ta)和(he)乳(ru)糖(tang)一(yi)樣(yang),可(ke)以(yi)與(yu)乳(ru)糖(tang)操(cao)縱(zong)元(yuan)的(de)阻(zu)遏(e)蛋(dan)白(bai)結(jie)合(he),使(shi)阻(zu)遏(e)蛋(dan)白(bai)的(de)空(kong)間(jian)構(gou)像(xiang)變(bian)化(hua),四(si)聚(ju)體(ti)解(jie)聚(ju)成(cheng)單(dan)體(ti),失(shi)去(qu)與(yu)操(cao)縱(zong)子(zi)特(te)異(yi)性(xing)結(jie)合(he)的(de)能(neng)力(li),從(cong)而(er)解(jie)除(chu)了(le)阻(zu)遏(e)蛋(dan)白(bai)的(de)作(zuo)用(yong),使(shi)其(qi)後(hou)的(de)基(ji)因(yin)得(de)以(yi)轉(zhuan)錄(lu)合(he)成(cheng)利(li)用(yong)乳(ru)糖(tang)的(de)酶(mei)類(lei)。與(yu)乳(ru)糖(tang)不(bu)同(tong)的(de)是(shi),IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用於藍白斑篩選。作用極強的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定
4.X-gal
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5.G418:
一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩定轉染最常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方後 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達 ,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方麵得以廣泛應用。
6.DMSO
二甲基亞碸.實驗室常用於作液體層析溶劑,同時用作測試物質紫外消光值上時用作參照物.能溶於所有烷烴和烯烴。
7.曲拉通X-100
TritonX-100.用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方麵有一定作用. 能力介於NP40和SDS之間,偏向於NP40
8.NP-40
很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA
牛血清白蛋白. 主要起維持滲透壓作用、PH緩衝作用、載zai體ti作zuo用yong和he營ying養yang作zuo用yong。在zai動dong物wu細xi胞bao無wu血xue清qing培pei養yang中zhong,添tian加jia白bai蛋dan白bai可ke起qi到dao生sheng理li和he機ji械xie保bao護hu作zuo用yong和he載zai體ti作zuo用yong。常chang用yong於yu蛋dan白bai定ding量liang中zhong的de內nei參can和he抗kang體ti稀xi釋shi液ye。
10.甲酰胺
甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩定劑,也用於穩定毛細管電泳中的變性單股DNA。
11.TEMED
四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合
12.巰基乙醇
一種強還原劑。可還原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態,有利於與SDS的結合。使蛋白解離成單個亞基。
13.甲叉雙丙烯酰胺
N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯劑與丙烯酰胺聚合而製備聚丙烯酰胺凝膠。
14.過硫酸銨
過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然後在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15.B27
一種添加劑,用於神經肝細胞培養,被認為具有抑製膠質細胞生長的作用。
16.DTT
二er硫liu蘇su糖tang醇chun,常chang用yong還hai原yuan劑ji,既ji有you抗kang氧yang化hua作zuo用yong。它ta能neng保bao護hu酶mei分fen子zi上shang的de還hai原yuan性xing基ji團tuan,維wei持chi還hai原yuan性xing環huan境jing,穩wen定ding酶mei的de活huo性xing。又you是shi一yi種zhong蛋dan白bai質zhi變bian性xing劑ji,破po壞huai二er硫liu鍵jian,濃nong度du不bu同tong,起qi到dao的de作zuo用yong也ye不bu同tong。
17.弗氏不完全佐劑和弗氏完全佐劑
弗(fu)氏(shi)完(wan)全(quan)佐(zuo)劑(ji)是(shi)一(yi)種(zhong)油(you)包(bao)水(shui)的(de)乳(ru)濁(zhuo)液(ye),含(han)結(jie)核(he)分(fen)枝(zhi)杆(gan)菌(jun)的(de)細(xi)胞(bao)壁(bi)成(cheng)分(fen)。佐(zuo)劑(ji)活(huo)性(xing)來(lai)自(zi)於(yu)油(you)滴(di)中(zhong)免(mian)疫(yi)原(yuan)的(de)持(chi)續(xu)釋(shi)放(fang),並(bing)刺(ci)激(ji)局(ju)部(bu)免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)。弗(fu)氏(shi)不(bu)完(wan)全(quan)佐(zuo)劑(ji)用(yong)於(yu)初(chu)次(ci)免(mian)疫(yi)刺(ci)激(ji)。為(wei)了(le)減(jian)少(shao)副(fu)作(zuo)用(yong),不(bu)含(han)結(jie)核(he)分(fen)枝(zhi)杆(gan)菌(jun)成(cheng)分(fen)的(de)弗(fu)氏(shi)不(bu)完(wan)全(quan)佐(zuo)劑(ji)用(yong)於(yu)加(jia)強(qiang)免(mian)
氏(shi)完(wan)全(quan)佐(zuo)劑(ji)是(shi)一(yi)種(zhong)油(you)包(bao)水(shui)的(de)乳(ru)濁(zhuo)液(ye),能(neng)夠(gou)非(fei)常(chang)有(you)效(xiao)的(de)誘(you)導(dao)產(chan)生(sheng)高(gao)滴(di)度(du)的(de)抗(kang)體(ti)。弗(fu)氏(shi)完(wan)全(quan)佐(zuo)劑(ji)含(han)結(jie)核(he)分(fen)枝(zhi)杆(gan)菌(jun)的(de)細(xi)胞(bao)壁(bi)成(cheng)分(fen),可(ke)以(yi)加(jia)強(qiang)對(dui)抗(kang)原(yuan)的(de)抗(kang)體(ti)反(fan)應(ying)。佐(zuo)劑(ji)活(huo)性(xing)來(lai)自(zi)於(yu)油(you)滴(di)中(zhong)免(mian)疫(yi)原(yuan)的(de)持(chi)續(xu)釋(shi)放(fang),並(bing)刺(ci)激(ji)局(ju)部(bu)免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)。
18.吐溫 20
Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19.吐溫 80
Tweenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20. 十二烷基肌氨酸鈉 脫細胞試劑,製備脫細胞組織工程支架材料
21.PVPP
PVPP對(dui)片(pian)劑(ji)具(ju)有(you)崩(beng)解(jie)作(zuo)用(yong),能(neng)和(he)各(ge)種(zhong)不(bu)溶(rong)於(yu)水(shui)的(de)藥(yao)物(wu)共(gong)容(rong),能(neng)穩(wen)定(ding)化(hua)各(ge)種(zhong)懸(xuan)浮(fu)劑(ji),又(you)具(ju)有(you)形(xing)成(cheng)絡(luo)合(he)物(wu)的(de)能(neng)力(li)以(yi)及(ji)吸(xi)附(fu)作(zuo)用(yong)等(deng),因(yin)而(er)可(ke)用(yong)作(zuo)醫(yi)藥(yao)助(zhu)劑(ji)。也(ye)用(yong)於(yu)除(chu)去(qu)啤(pi)酒(jiu)中(zhong)的(de)多(duo)酚(fen)。
22.PIPES
呱嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實驗室做緩衝劑用。全名是呱嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不幹擾生物化學反應,價格比較貴。常用在免疫和細胞類的實驗中,PIPES有時還被用來製備大腸杆菌感受態。
23.CTAB
十六烷基三乙基溴化銨,一種去汙劑,可溶解細胞膜,它能與核酸形成複合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時,從溶液中沉澱,通過離心就可將CTAB-核酸的複合物與蛋白,多糖類物質分開。最後通過乙醇或異丙醇沉澱DNA,而CTAB溶於乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現在實驗室最常用的一種提取核酸的手段。
24。HEPES
羥乙基呱秦乙硫磺酸,一種弱酸緩衝劑,主要作用是防止培養基pH迅速變化。在開放式培養條件下,培養基脫離了5%CO2的環境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持pH7.0左右。一般在進行克隆化培養時要添加HEPES
25.MOPS
一種緩衝液,有抑製RNA酶的作用,一般和甲醛(用於變形RNA)用於RNA變性電泳
26。鹽酸胍
鹽酸胍等可使蛋白質結構中的氫鍵發生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。
27。PMSF
Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用於抑製蛋白酶. PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收後有致命危險。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水衝洗之。凡被PMSF汙染的衣物應予丟棄。PMSF在水溶液中不穩定。應在使用前從貯存液中現用現加於裂解緩衝液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高於4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調節 為堿性(pH>8.6)並在室溫放置數小時後,可安全地予以丟棄。
28.溴酚藍
pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。
29。台盼蘭
台盼藍(Trypan Blue)或稱台盼蘭,是細胞活性染料,常用於檢測細胞膜的完整性
30。二甲苯青FF
用於瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶於水和醇,可與溴芬藍按照一定比例配置loading buffer
31。吖啶橙
是一種熒光色素,與細胞中DNA和RNA結合量存在差別,可發出不同顏色的熒光,與DNA結合量少發綠色熒光,與RNA結合量多發桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB隻染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌於兩個相鄰的堿基對之間,這樣在DNA複製過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時要戴手套,需避光。
32。EDTA和EGTA
EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩定的水溶性絡合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在.Mg2+存在下測定Ca2+時,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小於0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性..此外它與金屬離子形成的配合物的穩定性普遍比相應的EDTA配合物差。
33.TRICINE
N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳係統是Tris-甘氨酸係統;Tris-Tricine電泳則用於分子量小於10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果. 可以用前者代替。
34、PVP40
PVP40 中的CO - N = 有很強的結合酚類化合物的能力, 與其形成穩定的複合物, 常用於提取RNA時除去酚類。
35、脫氧膽酸鈉
離子型去垢劑,作用有:
1、裂解細胞;
2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶於水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹慎
36、6-BA
細胞培養中用到,細胞分裂素。
37、碘代乙酰胺
也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺. 用於有機合成,在蛋白組學中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用於多肽測序以及酶抑製劑等,蛋白組學級試劑
38、萘乙酸
NAA,為廣譜性植物生長調節劑,可促進細胞分裂,誘導形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等
39、番紅O
藏紅T;
氧化還原指示劑;生物染色;酸堿指示劑;滴定分析亞硝酸鹽。
40、TTC
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用於藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計數瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細菌菌落長成紅顏色,,對去除食品本底顆粒物幹擾非常有意義。
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